益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及相关机制研究

摘要

目的：研究益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)和骨保护蛋白(OPG)的影响,探讨益骨胶囊防治骨质疏松的作用机理.方法：选取10月龄SD雌性大鼠40只,随机分为4组.益骨胶囊低、中、高剂量组(益骨胶囊由淫羊藿、当归、白芍、枸杞子等8味中药组成)和对照组,每组10只,运用大鼠灌胃的方法 制备含药血清和对照血清.二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,传代后分为5组(空白血清对照组、模型组、益骨胶囊低、中、高剂量含药血清组),模型组用AGEs (400mg/L)处理,益骨胶囊低、中、高剂量组分别用AGEs (400mg/L)和低、中、高剂量含药血清共同处理,分别用pNPP、ELISA、茜素红染色法检测成骨细胞碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原、骨钙素以及矿化能力,实时荧光定量PCR测定成骨细胞中BMP-2、OPG mRNA的表达,ELISA检测BMP-2、OPG蛋白的表达量.结果：原代分离培养新生SD大鼠成骨细胞,具有典型的成骨细胞分化特性;400mg/L的AGEs可以降低成骨细胞分化和矿化能力,降低BMP-2、OPG的表达;益骨胶囊含药血清可以剂量依赖性的提高AGEs作用下成骨细胞的分化和矿化,提高BMP-2、OPG的表达.结论：益骨胶囊含药血清可以提高AGEs作用下成骨细胞分化和矿化能力,提高提高BMP-2、OPG的表达,这可能是益骨胶囊防治骨质疏松症的机制之一.