百日咳毒素阻断G蛋白耦联雌激素受体对雌激素活化PI3K-AKT信号通路的影响

摘要

目的:rn 研究百日咳毒素(PTX)阻断G蛋白偶联雌激素受体(GPER)对17β雌二醇(17β-E2)活化子宫内膜癌细胞HEC-1A和Ishikawa磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT信号通路的影响.探讨GPER在子宫内膜癌雌激素活化PI3K/AKT信号通路中的作用.rn 方法:rn 应用免疫细胞化学法检测子宫内膜癌细胞HEC-1A和Ishikawa中GPER蛋白的表达情况.不同浓度(0、0.1、0.5、1.0μg/mL)百日咳毒素(PTX)分别作用两种细30min后,1×10-6mol/L 17β-E2分别共同刺激HEC-1A细胞15min、Ishikawa细胞30min,用Western blot法检测两种细胞中GPER、Erα蛋白及Erβ蛋白的表达情况及AKT活化情况.rn 结果:rn 1.Ishikawa细胞中,GPER蛋白细胞浆阳性表达;随着PTX作用浓度的增加:P-AKT/AKT比值逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时比值下降最显著(F=63.729 P=0.0001);GPER的表达量逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时表达量下降最显著(F=160.284 P=0.0001);Erα和Erβ蛋白的表达量各浓度组间差异均无统计学差异.rn 2.HEC-1A细胞中,GPER蛋白细胞浆阳性表达;随着PTX作用浓度的增加:P-AKT/AKT比值逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时,AKT的活化被完全阻断(F=1039.321 P=0.0001);GPER的表达量逐渐下降,浓度为1.0 μg/mL时GPER的表达被完全抑制(F=833613 P=0.0001);Erα蛋白的表达量各浓度组间差异均无统计学意义.rn 结论:rn 1.Ishikawa细胞中,GPER蛋白细胞浆阳性表达;随着PTX作用浓度的增加:P-AKT/AKT比值逐渐下降,浓度为1.0μ g/mL时比值下降最显著(F=63.729 P=0.0001);GPER的表达量逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时表达量下降最显著(F=160.284 P=0.0001);Erα和Erβ蛋白的表达量各浓度组间差异均无统计学差异.rn 2.HEC-1A细胞中,GPER蛋白细胞浆阳性表达;随着PTX作用浓度的增加:P-AKT/AKT比值逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时,AKT的活化被完全阻断(F=1039.321 P=0.0001);GPER的表达量逐渐下降,浓度为1.0μg/mL时GPER的表达被完全抑制(F=833.613 P=0.0001);Erα蛋白的表达量各浓度组间差异均无统计学意义.