G蛋白偶联雌激素受体特异性活化促进骨肉瘤SW1353细胞生长的机制

摘要

目的 探讨G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupld estrogen receptor,GPER)特异性活化对骨肉瘤细胞生长的影响.方法 生物信息学预测临床骨肉瘤组织及对应正常组织中GPER基因表达差异,并应用Western blot法检测两者GPER蛋白表达情况;荧光定量PCR法与Western blot法筛选人成骨细胞系Hfob1.19及3种骨肉瘤细胞系MG-63、HOS、SW1353中GPER高表达细胞株,并利用细胞免疫荧光法检测SW1353细胞中GPER的表达及定位情况;CCK-8法与流式细胞学检测不同药物处理对骨肉瘤SW1353细胞增殖与细胞周期的影响,并采用Western blot法检测细胞周期蛋白cyclinA与cyclinD1的表达情况.结果 GPER在肿瘤组织/细胞中呈现高表达(P<0.05),其中骨肉瘤SW1353细胞中GPER表达量最高(P<0.05),其主要表达于细胞核与细胞质中.100 nmol/L药物浓度的GPER特异性激动剂G1可显著促进骨肉瘤SW1353细胞生长及细胞周期进展.与对照组相比,G1处理组中DNA合成期(S期)细胞比例明显升高,同时伴有细胞周期蛋白cyclinA与cyclinD1的表达增加(P<0.05).有趣的是,GPER特异性拮抗剂G15显著抑制G1所诱发的上述改变(P<0.05).结论 GPER特异性活化能明显上调细胞周期蛋白cyclinA与cyclinD1的表达,促进骨肉瘤SW1353细胞周期进展,从而促进骨肉瘤细胞异常生长.