一株枯草芽孢杆菌的鉴定及液体发酵工艺优化

摘要

从鸡肠道筛选出一株菌,命名为DY032,经过经16S rDNA分子鉴定和系统发育分析,该菌种为枯草芽孢杆菌.在摇瓶发酵条件下,采用单因素试验,对菌株DY032的培养基配方进行优化,确定了影响发酵液菌体数和芽孢数的5个因素,分别为淀粉、鱼粉、豆饼粉、MnSO4.H2O和CaCO3,其适宜浓度分别为20g/L、10g/L、10g/L、0.05g/L和0.05g/L,进一步通过L16(45)正交试验确定以上5因素的最佳配比.为进一步在发酵罐放大培养,在最优培养基基础上,利用10L发酵罐,采用L9(34)正交设计试验,以芽孢数为指标,对菌株DY032的培养温度,pH值、搅拌转速、通气量4个条件进行优化.结果表明,菌株DY032培养基最优配方为:淀粉16g/L,鱼粉10g/L,豆饼粉10g/L,MnSO4?H2O0.05g/L,CaCO30.03g/L.最优发酵罐培养条件为:培养温度为37°C,pH值为6.5,转速为200r/min,通气量为5L/min,最终芽孢数可达51.95×108CFU/mL.