摘要：脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)和伏马菌素B1(Fumonisin B1,FB1)作为毒理学最重要的镰刀菌毒素不仅影响机体的消化吸收,而且诱导细胞脂质过氧化造成细胞衰亡.本试验以猪肾细胞PK15为试验对象,采用低浓度DON、ZEN和FB,及其联合染毒处理,探究细胞抗氧化及凋亡相关指标的变化,从而确定低浓度下DON、ZEN和FB1毒性及联合染毒的交互作用.用N-乙酰半胱胺酸(N-acetylcysteine,NAC)同时处理,探讨其对氧化损伤和凋亡的保护效果.用不同浓度DON(0.25～8.0μM)、ZEN(5～160μM)和FB1(5～160μM)处理PK15细胞24h检测细胞存活率;在此基础上设计试验,以DON(0.25μM)、ZEN(20μμM)、FB1(10μM)单独及联合处理细胞24h,此外加入0.5mM NAC,检测单独及联合染毒对PK15细胞的损伤作用机制及NAC的保护效果.结果表明:①随着DON、ZEN、FB1浓度的增加,细胞活性呈剂量依赖性降低.②DON、ZEN、FB1均可以引起猪肾细胞内SOD、MDA、ROS等抗氧化功能相关指标改变,多数联合处理仅存在累加作用.③DON、ZEN、FB1单一及联合染毒均能诱导细胞凋亡;凋亡率中DON-FB1间及3种毒素联合处理存在协同作用.④0.5mM NAC对霉菌毒素诱导的氧化损伤有保护作用,提高细胞内抗氧化酶活性,降低MDA和ROS含量,减少细胞凋亡,对细胞有保护作用.综上所述,DON、ZEN、FB1及联合染毒可引起PK15细胞的氧化应激并引起细胞凋亡,联合染毒在不同作用位点上的交互作用较为复杂,添加NAC后能显著降低细胞的氧化损伤,提高细胞活力,减少细胞凋亡.
