血小板-巨噬细胞复合体中尿激酶型纤溶酶原激活物表达的研究

摘要

目的:建立血小板和巨噬细胞复合体,研究其中uPA的表达.方法：从昆明小鼠提取分离血小板，用不同浓度ADP火花血小板15min后，用流式细胞学技术检测血小板上P-选择素的表达;用ADP 20μmol/L活化血小板后，和小鼠巨噬细胞系Raw264. 7共同培养，建立复合体，在12h,15h,18h和21h时用Real-time PCR和ELISA法检测uPA的表达;再用未活化和活化血小板和巨噬细胞共同培养18h，巨噬细胞做对照，用Real-time PCR和ELISA法检测uPA的表达。用单因素方差分析比较uPA表达的变化。结果：1.检测血小板上P-选择素表达发现:10,20,40μmol/L ADP都能有效的活化血小板，相对于0u mol/L ADP组都有统计学意义(P<0.05)，但各组间血小板活化率无明显差异。2.活化血小板和巨噬细胞共同培养后，从12h到18h时uPA mRNA和分泌uPA都是逐渐增多的，而在21h时相对18h下降，有统计学意义(P<0.05)。3.巨噬细胞组和未活化组相比，uPA表达无显著增多，但活化血小板组明显增多，有统计学意义(P<0. 05)。结论：活化血小板和巨噬细胞复合体能诱导uPA表达增多。本研究用活化血小板诱导巨噬细胞，建立复合体系，首次发现了其能诱导uPA表达增多，探讨了血小板和巨噬细胞间的相互作用关系，并为uPA在粥样硬化形成和斑块稳定性中的作用提供了初步实验依据。