血管紧张素Ⅱ诱导平滑肌细胞和巨噬细胞表达组织因子和尿激酶型纤溶酶原激活物受体的研究

摘要

背景:随着研究的深入，肾素-血管紧张素系统目前被认为是血管疾病病理生理中重要的环节，其中研究最多的就是AngⅡ的作用。AngⅡ与动脉粥样硬化发病关系密切，相关的治疗策略已经被逐步广泛地运用于临床中。TF和uPAR各自作为凝血系统和纤溶系统的代表，在促进动脉粥样硬化形成的过程中有许多相似之处。它们的非凝血和纤溶作用，都是与细胞粘附、迁移以及增生相关，这些过程是与动脉粥样硬化形成相关的基本病理生理过程。本研究首次将TF和uPAR纳入同一体系，验证AngⅡ对二者表达的影响，从新的角度说明AngⅡ促进动脉粥样硬化的机制。 目的: 1.观察AngⅡ对血管平滑肌细胞以及巨噬细胞TF和uPAR的表达的影响并探索其胞内信号转导机制。 2.ARB和他汀类药物对上述诱导作用是否具有抑制作用，并从信号转导的角度分析抑制机理中相关的过程。 3.分析在动脉粥样硬化及其高危因素得患者中，TF和uPAR表达分布的特点，二者表达的关系。 方法: 1.采用组织贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞，进行形态学和α-actin免疫组化鉴定；传代培养THP-1细胞株并将其诱导为巨噬细胞。 2.采用免疫组化、细胞原位ELISA法检测AngⅡ、替米沙坦、阿托伐他汀以及PKC、MAPKp38、ERK1/2三种信号途径抑制物等药物对TF、uPAR蛋白表达的影响；RT-PCR检测对上述药物TF、uPARmRNA表达的影响。 3.用ELISA检测AngⅡ、替米沙坦、阿托伐他汀作用的细胞内PKC、IκB、NFκB含量。 4.发色底物法检测患者血浆中游离TF的活性；用ELISA法检测患者血浆中TF抗原量。 结果: 1.AngⅡ可以诱导人动脉平滑肌细胞的TF抗原和mRNA表达增多，此诱导作用主要通过PKC途径。替米沙坦和阿托伐他汀可以抑制该诱导作用，呈浓度依耐性，该抑制作用与降低胞内PKC含量有关。 2.AngⅡ可以诱导人动脉平滑肌细胞uPAR抗原和mRNA的表达增强，此诱导作用主要通过ERK1/2途径。替米沙坦和阿托伐他汀可以抑制该诱导作用，呈浓度依耐性。 3.该巨噬细胞模型可以表达TF及uPAR，而且与ERK1/2信号途径有关。但AngⅡ对巨噬细胞模型的刺激作用不明显。 4.不同浓度的替米沙坦和阿托伐他汀可以抑制巨噬细胞模型TF的抗原表达，呈浓度依赖性。替米沙坦对uPAR的表达抑制不明显，阿托伐他汀对uPAR的表达存在抑制作用，但与浓度没有相关性。 5.患者血浆中TF的活性：DM、稳定冠心病组＞代谢综合征组＞正常组和ACS组；血浆中TF抗原水平：ACS和代谢综合征患者＞DM、稳定冠心病组＞正常组。 结论: 1.体外实验证实AngⅡ对血管平滑肌细胞以及巨噬细胞诱导作用，促进TF及uPAR表达增高，从而在促进动脉粥样硬化形成，增加斑块促凝性，削弱斑块的稳定性方面发挥作用。ARB和他汀类药物抑制AngⅡ诱导TF及uPAR表达，从而发挥它们在心血管系统中的保护作用。 2.随着动脉粥样硬化相关疾病的严重程度增加，TF抗原表达量增加。而且与外周血单核细胞表面uPAR的表达具有一致性，二者虽然分属凝血系统和纤溶系统，但在促动脉粥样硬化过程中二者具有协同作用。

目录

缩略词表

前 言

实验材料

第一部分血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表达TF和uPAR以及替米沙坦和阿托伐他汀影响该诱导作用的研究

实验方法

实验结果

讨论

结论及局限性

第二部分血管紧张素Ⅱ诱导巨噬细胞表达TF和uPAR以及替米沙坦和阿托伐他汀影响该诱导作用的研究

第三部分动脉粥样硬化相关疾病患者血浆中TF活性及其抗原的检测

文献综述 血管紧张素Ⅱ与动脉粥样硬化

致谢

个人简历