丙戊酸钠对海马神经元胞内钙离子浓度的影响

摘要

目的：有关长时程增强的研究表明,神经元内Ca2+浓度的高低均与LTP的诱导及维持有关,神经元内Ca2+浓度升高的意义在于使突触囊泡释放的频率和效率增加,突触后神经元Ca2+内流是LTP诱导和维持的触发因素.本研究探索NMDA作用下VPA对海马神经元内Ca2+浓度的影响.方法：培养7天的海马神经元进行神经元鉴定及活性检测,然后分为3组,即对照组、VPA组、阴性对照组,三组均给予0.1 mM NMDA进行刺激,利用钙离子测定仪观察Fura-2 AM浓度变化反应神经元内Ca2+浓度的变化.VPA组在给予NMDA刺激前10 min给予70μg/ml VPA进行预处理.Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料,进入神经元后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2而被滞留在细胞内.Fura-2与神经元内Ca2+结合后在340nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱,可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度.在340nm、380nm两荧光比值增大时代表神经元内Ca2+浓度的提高,Nikon软件检测系统显示为神经元胞体呈现明亮的红色或橙红色.结果：在NMDA刺激前对照组与VPA组340nm/380nm荧光比值无差异(P＞0.05),而NMDA刺激后VPA组340nm/380nm荧光比值为1.49±0.11,明显低于对照组(1.94±0.14)(P＜0.05).结论：VPA可显著降低由NMDA刺激引起的神经元内Ca2+浓度的提高,这可能是VPA抑制LTP现象进而影响学习记忆功能的机制之一.