动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

摘要

将E.coli O157：H7(EHEC-O157：H7)用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB/c小鼠，制备免疫脾细胞：与SP/20骨髓瘤细胞融合后，获得七株分泌抗E.coli O157：H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3，Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ，IgMκ、IgMλ.、IgMκ和lgG2aκ。用间接ELISA检测，E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×10(3)，腹水效价均为1×10(11);C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10(1)％～2×10(2)，腹水效价均为1×10(3)。相加ELISA结果显示，F1、G9和G11三株mAbs对应相同的抗原表位，而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性，七株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明，C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带，而其它四株mAbs则未显示蛋白带。