毕赤酵母细胞表面展示疏水蛋白HFBI对共展示南极假丝酵母脂肪酶B的影响

摘要

通过来源于毕赤酵母的GPI型壁蛋白Gcw51和Gcw61作为锚定蛋白,将疏水蛋白HFBI和脂肪酶CALB共展示在毕赤酵母细胞表面;同时以只含脂肪酶CALB不含疏水蛋白HFBI的菌株CALB-Gcw51作为对照,研究疏水蛋白HFBI的修饰对细胞的影响.流式细胞术分析结果证明外源蛋白成功的连接在细胞表面.利用微生物粘着碳烃化合物法(MATH)测定细胞表面的疏水性,结果表明含疏水蛋白HFBI的菌株CALB-Gcw51/HFBI-Gcw61与对照菌株CALB-Gcw51相比,细胞表面的疏水率提高了100%.酵母细胞在甲醇诱导120h时测定菌体的CALB水解酶活力和合成酶活力分别为2054U/g、664U/g,与对照菌株CALB-Gcw51的水解酶活力和合成活力1641U/g、318U/g相比,分别提高了25%,109%.