产紫青霉MHZ111的化学成分及其抗炎作用机制研究

摘要

炎症是十分常见而重要的基本病理过程,可发生于机体的任何部位和任何组织,人类的大多数疾病常与炎症过程有关.在炎症反应中,巨噬细胞起着重要作用,是体内启动炎症介质产生的中心细胞,其激活时会释放NO、TNF-α等炎症因子以及IL-1β、IL-6等细胞因子[1,2].真菌中含有多种次生代谢产物，一直以来是新颖结构化合物的重要来源。为了发现具有抗炎活性的先导化合物，本课题组从产紫青霉Penicillium purpurogenum MHZ111的乙酸乙酯提取物中分离鉴定了19个化合物，包括9个杂萜类化合物（1.9），4个二氢异香豆素（10，12.14），3个香豆素（11、15、16）和3个其他类成分（17.19）。其中化合物1.5、10和11为新化合物（图1），通过X-ray单晶衍射、计算ECD等方式确定了绝对构型（图2和3）。利用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞筛选出了化合物purpurogenolide B (2)、purpurogenolide C (3)、purpurogenolide D (4)、berkeleyacetal C (6)、3-乙酰氧基6,8-二甲氧基香豆素(11)和vermistatin (17)等6个化合物具有一定的抑制NO释放活性，IC50分别为30.0 ± 1.5、15.5 ± 0.5、8.8 ± 0.1、0.8 ± 0.1、26.5 ± 0.3、52.7 ± 1.3 μΜ[3,4]，具有一定的抗炎活性。同时，对活性最强化合物berkeleyacetal C (6)的作用机制进行了研究。ELISA结果显示，berkeleyacetal C能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1和MIP-1α；RT-PCR结果显示其在浓度大于1 μM时能够明显抑制上述炎症因子的基因转录（图4）。Western blot结果显示berkeleyacetal C对STAT1/3的磷酸化具有显著的抑制作用，证明其通过阻断STAT1/3信号通路抑制RAW264.7巨噬细胞活化（图5）。