姜黄素通过促进细胞凋亡和下调HSP27和P-gp的表达逆HCT-8/5-FU细胞的耐药性

摘要

目的：黄素对人结肠癌耐药细胞株(HCT-8/5-FU)耐药逆转作用及耐药机制. 方法：采用CCK8方法检测非耐药细胞株(HCT-8)和耐药株的生长周期,姜黄素、5-FU以及二者联合应用对两种细胞株的生长抑制率;采用流式细胞术法检测姜黄素、5-FU以及二者联合应用时对两种细胞株细胞周期和凋亡率的影响;透射电镜用于观察两种细胞株的超微结构;RT-PCR和Western blot方法分别用于检测用姜黄素以及5-FU对两种细胞株P-gp和HSP-27 mRNA和蛋白水平的影响. 结果：姜黄素和5-FU均可抑制两种细胞株的指数生长期,且抑制作用呈计量依赖;与耐药株相比,HCT-8对姜黄素和5-FU更加敏感;5-FU联合姜黄素4.0μg/mL或5.5μg/mL对耐药株的IC50分别为179.26μg/mL,89.25μg/mL,耐药逆转倍数分别为1.85和3.71;姜黄素和5-FU联用具有协同效应,可使细胞停留在G0/G1期,发生凋亡;5-FU与姜黄素联用后细胞凋亡率显著高于其他组;5-FU联用中剂量的姜黄素,耐药株P-gp(0.28±0.02)和HSP27(0.28±0.09) mRNA水平低于单独使用5-FU(P-gp, 0.48±0.07,P=0.009;HSP27,0.57±0.10,P=0.007);P-gp(0.25±0.06)和HSP27(0.09±0.02)的蛋白水平显著低于单独使用5-FU(P-gp, 0.46±0.02,P=0.005;HSP27,0.43±0.01,P=0.000). 结论：姜黄素能够抑制人类结肠癌细胞的增殖;与5-FU联用具有协同作用,可逆转多重耐药结肠癌细胞对5-FU的耐药性;姜黄素可能通过下调P-gp和HSP27的水平逆转耐药株对5-FU耐药性.