单抗MC3免疫鼠重组噬菌体抗体ScFv文库的构建及初筛

摘要

肿瘤是严重威胁人类健康的疾患.随着分子生物学和分子免疫学的发展,人们已开始尝试使用肿瘤疫苗(瘤苗)进行预防.其中基于免疫网络学说的抗独特型抗体(抗-Id)瘤苗更是倍受人们的关注.近年,已在许多动物中证实,模拟肿瘤相关抗原(TAA)的抗-Id可激发机体的抗肿瘤免疫应答,其中某些肿瘤(如黑色素瘤、结直肠癌、卵巢癌等)TAA的抗-Id已开始进入临床Ⅰ和Ⅱ期验证,并已在某些病例显示出一定的疗效,这使得人们对研制和开发抗-Id瘤苗充满了信心. 结肠癌是一种高发病率和死亡率的恶性肿瘤,针对此肿瘤,本所制备了特异性较好的鼠抗人结肠癌细胞单抗MC3.本文用单抗MC3免疫BALB/c小鼠,取其脾脏分离mRNA,构建噬菌体抗体单链可变区片段(ScFv)文库,并以MC3为包被物对文库进行四轮筛选和富集,从而为下一步筛选和制备针对结肠癌的抗-Id ScFv,并为探讨其诱导抗结肠癌免疫的能力奠定了基础.