幽门螺杆菌感染诱发C57BL/6小鼠胃癌及COX-2的作用机制

摘要

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌过程中微血管密度(Microvessel density,MVD)和血管内皮生长因子(Vascularendothelial growth factor,VEGF)表达的变化及其可能的机制.rn 方法:将80只SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组,每组40只.对照组正常饲养,模型组采用H.pylori标准株SS1灌胃的方法建立H.pylori 感染诱发C57BL/6 小鼠胃癌动物模型.72周后,免疫组化法检测小鼠胃粘膜微血管密度MVD的变化,实时荧光定量PCR法(RFQ-PCR)和免疫组化法检测胃粘膜VEGF、Cyclooxygenase-2(COX-2) mRNA 和蛋白的表达,并对COX-2mRNA和蛋白与VEGF mRNA 和蛋白作直线相关分析.采用COX-2特异性抑制剂NS398(50μM)抑制COX-2的表达后,检测H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞VEGF mRNA表达的影响.rn 结果:72周时,模型组慢性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生、异型增生、胃癌的发生率分别为100％,88.9％,77.8％,33.3％和22.2％,胃粘膜组织中MVD为18.56±2.62,较对照组2.50±1.54明显升高,P＜0.01.模型组VEGF、COX-2 mRNA和蛋白的表达较对照组都明显增加,P＜0.01;直线相关分析显示,COX-2 mRNA和蛋白与VEGF mRNA和蛋白呈显著正相关.采用COX-2特异性抑制剂NS398抑制COX-2表达后,H.pylori 诱导的VEGF mRNA的表达明显下调,P＜0.01.rn 结论:H.pylori长期感染可诱发C57BL/6小鼠胃粘膜癌变,并可能通过COX-2介导的VEGF的表达促进MVD的增加,在胃粘膜的癌变中发挥作用.