大鼠骨髓血管内皮祖细胞分离、培养、诱导分化及鉴定

摘要

目的：探索大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)的分离、培养、诱导分化及鉴定方法。rn 方法：冲洗大鼠骨髓腔，梯度密度离心法获得单个核细胞，内皮细胞培养液EGH-2MY培养，通过细胞形态，免疫组化和免疫荧光检测CD34、VEGFR-2、vWF，CDl33，摄取Dil-ac-LDL和结合FITC-Lectin-UEA-1，超微结构及染色体核型分析进行鉴定。rn 结果：新分离的骨髓单个核细胞呈圆形，大小不一，48h后部分细胞开始贴壁，呈梭形、纺锤形或不规则形，4～8d呈细胞集落或线状排列，9～11d接近融合，呈典型鹅卵石样外观。贴壁细胞CD34、CD31、VEGFR-2、vWF、CDl33均表达阳性并呈动态变化，能够摄取Dil-ac-LDL和结合FITC-Lectin-UEA-1，透射电镜见特征性Weible-Palade小体，能稳定保持二倍体核型。rn 结论：本实验初步建立了一套大鼠骨髓血管内皮祖细胞分离、培养、诱导分化及鉴定方法体系。