兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法

摘要

用RHDV单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立兔瘟病毒 (RHDV) 抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价.结果 表明,单抗最佳包被浓度为1 μg/mL,兔多抗血清最佳浓度为4 μg/mL,本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26 ng/mL,对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA实验的3～13倍,对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7％,HA实验阳性检出率为55.2％,用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性.本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测.