NSPc1通过RARE抑制p21Waf1/Cip1的转录，促进细胞G2/M过渡和细胞增殖

摘要

哺乳动物多梳类蛋白在细胞周期控制和肿瘤发生中发挥重要的作用。它们是表观遗传学的染色质调节因子，在发育过程中，通过细胞分裂在转录水平上使目的基因失活，因此提供了一个细胞记忆装置。人NSPcl基因编码的蛋白与Mel-18及Bmi-1高度同源。此外，NSPcl蛋白主要定位在细胞核，并具有转录抑制活性。rn 近来我们发现，NSPcl能够促进肿瘤细胞周期的前进，细胞增殖及细胞集落形成。半定量RT-PCR表明，在肿瘤细胞系中NSPcl的过表达或下调，不影响绝大多数细胞周期蛋白依赖的激酶(CDK)抑制因子的表达水平，p21waf1/Cip1除外。在COS-7和Hela细胞中转染NSPcl，可以将p21启动子荧光素酶报告基因的表达抑制到对照组的一半，抑制具有剂量依赖性，这种抑制是p53结合位点非依赖性的，而是维甲酸反应元件(RARE元件)依赖性的。此外，体内共转染NSPcl和c-Myc表现出对p21 waf1/cip1启动子荧光素酶报告基因转录的协同抑制效应。染色质免疫沉淀(ChIP)和DNA pulldown实验也证明，NSPcl直接结合到含有RARE元件的p21 waf1/cip启动子区，并且p21启动子区中的RARE元件募集NSPcl和RXRa。进一步的分析表明，NSPcl在体外和体内都能与RA受体竞争PARE元件。总的来看，我们的结果支持如下假说：NSPcl通过RARE元件下调p21waf1/Cip1，RARE元件将PcG的转录抑制与CKDI和RA信号通路直接联系起来，从而在肿瘤细胞生长中发挥积极作用。