牛乳铁蛋白基因N-lobe的cDNA克隆及毕赤酵母表达载体的构建

摘要

牛乳铁蛋白N-lobe与牛乳铁蛋白的许多功能密切相关，本实验以牛乳腺组织总RAN为模板，通过RT-PcR的方法克隆得到牛乳铁蛋白基因的N-lobe片段，通过TA克隆把它连接到pGM-T克隆载体上，本实验测序结果表明：N-lobe片段大小为1028bp，与Gen Bank中登录的序列的相应部位相比，所获牛乳铁蛋白N-lobe cDNA序列的同源性为99.7％。最后利用限制性内切酶连入巴氏毕赤酵母表达载体pPICZ α A中成功构建其真核表达载体pPICz-N-lobe。