当归补血方对大鼠纤维化肝组织HIF-1α表达的影响

摘要

@@目的 观察当归补血方通过改善肝组织缺氧的抗肝纤维化作用机制。方法 Wistar雄性大鼠，随机分为正常组(N)、模型对照组(M)、当归补血汤方组(Danggui Buxue Tang, DBT)、N-乙酰半胱氨酸对照组(NAC)。采用CCl4复合因素造模方法，共6w。自造模之日起，当归补血汤各用药组均以6g/kg, N-乙酰半胱氨酸以0.1g/kg的大鼠体重剂量用药灌胃(相当于60kg等体重成人剂量的10倍量)，每日1次，共6w。正常组和模型对照组灌胃以等量生理盐水。HE染色观察大鼠肝脏炎症病理;天狼猩红染色观察大鼠肝组织胶原纤维沉积变化;免疫组化法观察大鼠肝组织中HIF-1α蛋白的表达;Western blot分析大鼠肝组织HIF-1α蛋白表达的变化;Real time PCR分析大鼠肝组织HIF-1α mRNA表达的变化.结果 HE染色与天狼猩红染色表明该模型肝组织肝腺泡Ⅲ区的肝细胞具有明显的脂肪变性与肝纤维化病理特点，DBT与NAC能显著改善肝脂肪变性与肝纤维化;免疫组化染色发现，正常组大鼠肝组织几乎无HIF-1α蛋白表达，模型组大鼠肝组织HIF-1α蛋白表达显著增加，主要分布于肝细胞核中，集中表达在以肝细胞脂肪变性区域。与模型组比较，DBT和NAC组HIF-1α蛋白均阳染表达明显减少。Western blot证实DBT和NAC组能明显抑制纤维化大鼠HIF-1α蛋白表达;定量PCR证实DBT和NAC组能明显下调HIF-1αmRNA表达。结论 DBT可明显改善肝腺泡Ⅲ区肝细胞脂肪变性与肝纤维化，其作用机制与改善该区域组织缺氧有关。