胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要

本文根据胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针，建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测胎儿弯杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示，该方法检测胎儿弯杆菌结果均为阳性，而非胎儿弯杆菌均为阴性；对带有SapA基因的阳性质粒的检测敏感性为108-102拷贝/μl范围内具有良好的线性关系，可敏感地检测到模板中13个拷贝的细菌DNA，其灵敏度是常规PCR方法的100倍。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。该方法为胎儿弯杆菌病的定性HE定量检测提供了有力的工具，为胎儿弯杆菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。