基于DNA条形码和1H-NMR代谢组学技术的多基原藏药沙棘二维鉴定体系的构建

摘要

目的：DNA条形码结合1H-MR代谢组学技术构建多基原藏药沙棘的二维鉴定体系.rn 方法：应用ITS2组合psbA-trnH序列,对沙棘7种及11个亚种进行识别,序列样本采用MEGA5.1进行种内及种间变异,K2P遗传距离分析,并构建系统发育树.应用核磁共振波谱仪检测分析3种不同基原沙棘样品,获得1H NMR谱图,所得自由衰减信号导入MestReNova软件进行分段积分、主成分分析,偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)进行模式识别.rn 结果：从藏药沙棘干果中成功提取DNA,ITS2和psbA-trnH扩增及测序成功率分均为100％.NJ树中沙棘7种和4亚种能明显的区分,表明ITS2+psbA-trnH组合序列可以作为鉴别沙棘7种和4亚种的DNA条形码序列.1H-NMR代谢组学结果表明,从沙棘提取物中同时检测并鉴定出黄酮类、五环三萜类、生物碱类等25个不同化学类型的代谢成分,经过PCA、PLS-DA分析,3种不同基原藏药沙棘能够得到有效鉴定.rn 结论：本文建立DNA条形码技术结合1H-NMR代谢组学技术对多基原藏药沙棘的二维鉴定体系,为藏药真伪鉴别提供了一种新思路,为其临床用药安全性提供了保障.