免疫亲和色谱—高效液相色谱法检测鸡肌肉中的3种磺胺类药物

摘要

磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)是一类可有效预防和治疗细菌性感染的抗生素，目前广泛应用于畜禽生产中，从而造成动物组织中该类药物的残留。本研究旨在建立鸡肌肉中磺胺二甲基嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺甲基嘧啶3种磺胺类药物残留的免疫亲和色谱-高效液相色谱检测方法。利用抗磺胺二甲基嘧啶簇特异性单克隆抗体制备了免疫亲和色谱柱，该IAC柱选用4 mL甲醇作为洗脱液，对3种SAs的动态柱容量为16181～195 ng/mL gel，绝对柱容量为335～404ng/mg IgG。该IAC柱每三天使用一次，重复12次后，SM2的柱容量仍能达到795 ng/mL gel，能满足SAs残留分析的要求。鸡肌肉样品经甲醇-水(8+2，v/v)提取，取一半提取液，加35 ml PBS进行稀释。经免疫亲和色谱柱净化后，以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相，反相高效液相色谱-紫外检测器检测，检测波长270 nm。本方法在鸡肉组织中的检出限为3 ng/g，定量限为10 ng/g。在10、20、50 ng/g的添加水平上，鸡肌肉组织中各药物的回收率在75.4％～98.5％之间，变异系数小于7.4％。