RNA干扰下调caveolin-1基因对大鼠肺水肿的影响

摘要

目的：探讨RNA干扰(RNAi)下调大鼠肺脏caveolin-1基因表达对其肺脏微血管通透性的影响。rn 方法：实验动物随机分为实验组和对照组，以阳离子脂质体为载体，将生物合成的caveolin-1 siRNA及caveolin-1 siRNA阴性对照链按0.4，0.8，1.2mg/kg三个剂量梯度分别注入大鼠双侧肺脏，注射后24，48，72h三个时间点以western blot及免疫组化(IHC)检测肺脏caveolin-1蛋白的表达,RT-PCR检测caveolin-1基因表达，western blot检测水通道蛋白(AQP)-1的表达。胸部透视了解肺水肿情况。以1.0ml/kg标准将1%伊文氏兰经尾静脉注射入体内后，取肺中叶浸浴甲酰胺中，分光光度计检测620nm处OD值。rn 结果：实验组72h时caveolin-1基因沉默率约为85%，实验组AQP-1表达变化不明显;对照组三个浓度梯度间caveolin-1表达无明显差异。胸透显示实验组肺叶密度增高,在三个浓度梯度分别转染72h后，甲酰胺OD值较对照组明显增高(P<0.01)。rn 结论：caveolin-1蛋白是调控肺水肿形成的重要因素,且其调控作用不通过AQP-1途径。