小鼠血清中弓形虫peroxiredoxin抗原间接ELISA检测方法的建立

摘要

目的:建立小鼠血清中弓形虫peroxiredoxin(Prx)抗原的间接EIASA检测方法。rn 方法:应用棋盘滴定法确定最佳被检血清浓度、抗体浓度、酶标二抗浓度。确定封闭液对结果的影响，绘制蛋白定量标准曲线，对建立的间接EL,ISA法进行验证，并对30份弓形虫感染小鼠血清及30份正常小鼠血清进行检测。rn 结果:间接ELISA的最佳条件为：被检血清最适包被浓度为1：50，大鼠抗弓形虫血清最佳稀释度为1：100(效价1：128)，酶标二抗的最佳稀释度为1：4 000。封闭剂对实验结果的影响不大。该方法灵敏度较高，重复性较好，特异性较强，检测30份弓形虫感染小鼠血清的检出率为100％。rn 结论:已建立了检测小鼠血清中弓形虫Prx抗原的间接ELISA法，可用于弓形虫病的诊断及流行病学调查。