Caco-2细胞体外吸收模型的建立、评价及其在营养素吸收研究中的应用

摘要

本研究的目的是建立Caco-2 细胞体外吸收模型并对其进行评估。rn 细胞接种在Transwell转运培养槽的微孔滤膜上,进行体外培养。采用细胞形态学、碱性磷酸酶活性、跨膜电阻值和荧光黄通透率等指标对细胞模型进行检测。结果发现Caco-2细胞培21 d后,细胞间形成紧密连接,微绒毛亦整齐致密;碱性磷酸酶活力比(Ap/BL)随时间的增加而迅速增长,第21 d后比值达到14.85士0.164;跨膜电阻值达到恒定值,为(500士12)Ω?cm2;荧光黄通透率Papp为3.35×1O-7 cm/s,低于通透实验规定的5.O×10-7cm/s。在本实验室条件下构建的Caco-2细胞模型在形态上与小肠上皮细胞相似,细胞己产生极性,模型的完整性、紧密性与通透性都通过了验证,可作为小肠吸收的体外模型,在营养素吸收转运、生物利用度及代谢机制研究中有不可取代的意义。