耐高温α-淀粉酶

摘要： 采用微波辅助酶解制备玉米抗性淀粉,以玉米抗性淀粉收率为指标,在单因素试验基础上,进行Box-Behnken试验设计,对耐高温α-淀粉酶添加量和酶解时间、普鲁兰酶添加量和酶解时间4个因素进行响应面优化试验分析.结果表明4个因素的影响主次关系为普鲁兰酶酶解时间>耐高温α-淀粉酶酶解时间>耐高温α-淀粉酶添加量>普鲁兰酶添加量.响应面优化试验确定微波辅助酶解制备玉米抗性淀粉的最优工艺参数:耐高温α-淀粉酶添加量3 U/g干淀粉、酶解时间30 min,普鲁兰酶添加量8 U/g干淀粉、酶解时间4.5 h.

摘要： 概述了酒精行业形势及生产工艺,对采用赛诺耐高温α-淀粉酶(酒精发酵专用型),分别运用95°C低温蒸煮液化、105°C中温蒸煮液化的酒精甲乙生产企业生产过程液化、发酵及产品指标进行了研究分析,结果表明赛诺耐高温α-淀粉酶(酒精发酵专用型)是一种良好的酒精液化用酶,应用于低温蒸煮可以显著提高酒精质量以及出品率.

摘要： 耐高温α-淀粉酶是数千年前即取得工业化应用的重要工业用酶.由于其具有热稳定性好、液化彻底、易保存等优势,在淀粉制糖、味精、啤酒等食品发酵以及纺织印染等行业都有着广泛的应用.本文首先就耐高温α-淀粉酶的菌种来源、结构与功能、α-淀粉酶酶活性提升、基因工程菌的构建等方面已取得的研究成果进行综述,然后对耐高温α-淀粉酶外源表达最新研究成果进行了总结.文章最后分析讨论了在耐高温α-淀粉酶开发方面国内现有水平与国际领先水平的差距,以期为耐高温α-淀粉酶的开发提供参考及思路.相信随着代谢工程和过量表达等技术手段的相继应用及业界的持续努力,我国耐高温α-淀粉酶的开发必将取得飞跃式发展.

摘要： 为了提高镇江香醋的生产效率,对镇江香醋糖化工艺中的蒸煮时间、耐高温α-淀粉酶和糖化酶添加量的单因素试验和三因素三水平正交试验进行了研究.实验结果表明:糖化工艺中蒸煮时间为6 s、糖化酶添加量为100 U/g糯米和耐高温α-淀粉酶添加量为20 U/g糯米最佳,在此条件下进行了3批发酵实验验证,酒醅的酒精度达到12％,得到了理想的结果.%In order to improve the production efficiency of Zhenjiang aromatic vinegar,the single factor test for Zhenjiang aromatic vinegar saccharification process such as cooking time,additive amount of thermostable alpha amylase and glucoamylase and three factors-three levels orthogonal test are studied. The experimental results show that the cooking time is 6 s,the additive amount of glucoamylase is 100 U/g glutinous rice and the additive amount of thermostable alpha amylase is 20 U/g glutinous rice. Under these conditions,three batches of fermentation experiments are carried out to verify that the alcohol content of the fermented grains reaches 12％,and the desired results are obtained.

摘要： 研究了以大米为原料生产制作饴糖的工艺条件.通过单因素实验对饴糖质量的影响等进行初探;以饴糖中的麦芽糖和葡萄糖含量为主要的指标,同时辅助DE值、粘度、波美度、固形物含量等指标来进行综合分析.根据单因素实验,设计三因素两水平正交L8(32)实验探索制备饴糖的最适工艺条件.研究结果表明:加水比为1∶3,耐高温α-淀粉酶的用量为0.2g(酶活力为4000U/g),糖化酶用量为50μL(酶活力为150000 U/mL),液化时间为12 min,糖化时间为2h,真空干燥时间为6h的条件下,所得饴糖质量较好,其麦芽糖含量为492.3 g/L,葡萄糖含量为424.5 g/L,粘度为120 mPa·s.

摘要： 熬糖温度是淀粉糖的质量指标之一,不同的产品对糖浆熬糖温度的要求不同,生产硬糖时需要糖浆具有高熬糖温度.研究了液化和糖化过程使用的酶制剂及不同水解程度对糖浆熬糖温度的影响.结果表明,相同条件下,水解程度越高,熬糖温度越高;液化阶段使用杰能科耐高温α-淀粉酶,糖化阶段使用杰能科β-淀粉酶有助于糖浆熬糖温度的提高.

摘要： 淀粉酶是食品、发酵行业应用最广泛的酶种之一.从最适温度、最适pH值、保存温度、缓冲溶液pH值等方面对5种不同的耐高温α-淀粉酶酶活的影响进行了研究.结果表明:耐高温α-淀粉酶B的耐酸性最好,在pH4.00～7.50之间,相对酶活为98 ％～100％;耐高温淀粉酶A的耐高温性最好,在反应温度70°C～100°C之间,相对酶活为100％～121％;耐高温α-淀粉酶A的缓冲溶液稳定性最好,在缓冲溶液pH4.50～7.00之间,酶活维持在91％～100％;耐高温α-淀粉酶E温度稳定性质最好,在储存温度30°C～60°C之间,相对酶活为98％～100％.为淀粉酶的选择奠定基础.

摘要： 蒸馏废液回用可有效减少酒精生产中的废水排放量,但会导致发酵结束后残糖升高.研究发现,蒸馏废液对液化过程的抑制是造成残糖升高的主要原因.文中考察了蒸馏废液中金属离子对耐高温α-淀粉酶酶活及二级结构(α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规则卷曲)的影响.结果表明,在对应浓度下(与蒸馏废液中的浓度一致),Na+ (55.89 mmol/L)和K+(33.27 mmol/L)对淀粉酶酶活没有影响;Al3+ (3.85 mmol/L)和Li+ (0.98mmol/L)对酶活有轻微抑制;Mg2+ (7.24 mmol/L)和Ca2+ (3.87 mmol/L)对酶活有促进作用;Fe3+(1.40 mmol/L)使酶活下降19.18％.淀粉酶二级结构中α-螺旋含量下降可能是Fe3+造成酶活下降的原因.蒸馏废液中加入16mmol/L Mg2可以使液化效果恢复至正常水平,并降低酒精发酵结束后的残糖含量.

摘要： 为研究耐高温α-淀粉酶与面条品质的关系,通过考察耐高温α-淀粉酶对面粉糊化特性以及制成面条烹煮损失的影响,找出合适的该酶添加水平和制作面条的工艺参数.结果表明,随着酶添加量的增大,面粉的峰值粘度、谷值黏度、回生值以及最终黏度都呈降低趋势,破损值一直增大.此外,酶添加量与面条的表观、透明性以及光滑性呈负相关,当加酶量为0.1 U/g(面粉)时,面条的烹煮损失及面汤的浊度最小,品质较好.添加耐高温α--淀粉酶生产面条的最佳配比为:加酶量0.1 U/g、加盐量1％、加碱量0.15％(均以面粉质量计).

摘要： 为了加强对蜂蜜品质的监管,采用分光光度法对中国蜂蜜中外源性耐高温α-淀粉酶活性进行了研究.基于来自国内各地区10种50个单一蜜种纯正蜂蜜,找出了酶解反应的条件和纯正蜂蜜自身α-淀粉酶选择性灭活的条件.样本在70°C下30 rain下选择性灭活后,在1.30 tmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH5.3)中于40°C下测定样本的高温α-淀粉酶活性.采用本法在67个日常检测样本中检出23个样本含有高温α-淀粉酶.由于纯正蜂蜜中不含有这种外源性高温α-淀粉酶,通过选择性灭活后测定样本中耐高温α-淀粉酶活性,可以有效鉴定在蜂蜜生产过程中是否掺入了外源性的糖浆.

摘要： 为了加强对蜂蜜品质的监管,采用分光光度法对中国蜂蜜中外源性耐高温α-淀粉酶活性进行了研究.基于来自国内各地区10种50个单一蜜种纯正蜂蜜,找出了酶解反应的条件和纯正蜂蜜自身α-淀粉酶选择性灭活的条件.样本在70°C下30 rain下选择性灭活后,在1.30 tmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH5.3)中于40°C下测定样本的高温α-淀粉酶活性.采用本法在67个日常检测样本中检出23个样本含有高温α-淀粉酶.由于纯正蜂蜜中不含有这种外源性高温α-淀粉酶,通过选择性灭活后测定样本中耐高温α-淀粉酶活性,可以有效鉴定在蜂蜜生产过程中是否掺入了外源性的糖浆.

摘要： 为了加强对蜂蜜品质的监管,采用分光光度法对中国蜂蜜中外源性耐高温α-淀粉酶活性进行了研究.基于来自国内各地区10种50个单一蜜种纯正蜂蜜,找出了酶解反应的条件和纯正蜂蜜自身α-淀粉酶选择性灭活的条件.样本在70°C下30 rain下选择性灭活后,在1.30 tmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH5.3)中于40°C下测定样本的高温α-淀粉酶活性.采用本法在67个日常检测样本中检出23个样本含有高温α-淀粉酶.由于纯正蜂蜜中不含有这种外源性高温α-淀粉酶,通过选择性灭活后测定样本中耐高温α-淀粉酶活性,可以有效鉴定在蜂蜜生产过程中是否掺入了外源性的糖浆.

摘要： 为了加强对蜂蜜品质的监管,采用分光光度法对中国蜂蜜中外源性耐高温α-淀粉酶活性进行了研究.基于来自国内各地区10种50个单一蜜种纯正蜂蜜,找出了酶解反应的条件和纯正蜂蜜自身α-淀粉酶选择性灭活的条件.样本在70°C下30 rain下选择性灭活后,在1.30 tmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH5.3)中于40°C下测定样本的高温α-淀粉酶活性.采用本法在67个日常检测样本中检出23个样本含有高温α-淀粉酶.由于纯正蜂蜜中不含有这种外源性高温α-淀粉酶,通过选择性灭活后测定样本中耐高温α-淀粉酶活性,可以有效鉴定在蜂蜜生产过程中是否掺入了外源性的糖浆.

摘要： 为了加强对蜂蜜品质的监管,采用分光光度法对中国蜂蜜中外源性耐高温α-淀粉酶活性进行了研究.基于来自国内各地区10种50个单一蜜种纯正蜂蜜,找出了酶解反应的条件和纯正蜂蜜自身α-淀粉酶选择性灭活的条件.样本在70°C下30 rain下选择性灭活后,在1.30 tmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH5.3)中于40°C下测定样本的高温α-淀粉酶活性.采用本法在67个日常检测样本中检出23个样本含有高温α-淀粉酶.由于纯正蜂蜜中不含有这种外源性高温α-淀粉酶,通过选择性灭活后测定样本中耐高温α-淀粉酶活性,可以有效鉴定在蜂蜜生产过程中是否掺入了外源性的糖浆.

摘要： 本文利用重组毕赤酵母基因工程茵诱导表达可产生耐高温α-淀粉酶,在摇瓶发酵的水平上,从诱导时间、甲醇添加量、pH值、接种量4个因素考察了发酵条件对耐高温α-淀粉酶酶活的影响,结合四元线性回归正交设计研究方法构建出甲醇诱导重组毕赤酵母生产耐高温α-淀粉酶的回归模型;优化最佳工艺参数为：诱导时间96h、甲醇添加量0.5%、接种量150mL、摇床转速200r/min。确定最优工艺条件下,耐高温α-淀粉酶酶活为217.2U/mL。

摘要： 本文利用重组毕赤酵母基因工程茵诱导表达可产生耐高温α-淀粉酶,在摇瓶发酵的水平上,从诱导时间、甲醇添加量、pH值、接种量4个因素考察了发酵条件对耐高温α-淀粉酶酶活的影响,结合四元线性回归正交设计研究方法构建出甲醇诱导重组毕赤酵母生产耐高温α-淀粉酶的回归模型;优化最佳工艺参数为：诱导时间96h、甲醇添加量0.5%、接种量150mL、摇床转速200r/min。确定最优工艺条件下,耐高温α-淀粉酶酶活为217.2U/mL。

摘要： 本文利用重组毕赤酵母基因工程茵诱导表达可产生耐高温α-淀粉酶,在摇瓶发酵的水平上,从诱导时间、甲醇添加量、pH值、接种量4个因素考察了发酵条件对耐高温α-淀粉酶酶活的影响,结合四元线性回归正交设计研究方法构建出甲醇诱导重组毕赤酵母生产耐高温α-淀粉酶的回归模型;优化最佳工艺参数为：诱导时间96h、甲醇添加量0.5%、接种量150mL、摇床转速200r/min。确定最优工艺条件下,耐高温α-淀粉酶酶活为217.2U/mL。

摘要： 本文利用重组毕赤酵母基因工程茵诱导表达可产生耐高温α-淀粉酶,在摇瓶发酵的水平上,从诱导时间、甲醇添加量、pH值、接种量4个因素考察了发酵条件对耐高温α-淀粉酶酶活的影响,结合四元线性回归正交设计研究方法构建出甲醇诱导重组毕赤酵母生产耐高温α-淀粉酶的回归模型;优化最佳工艺参数为：诱导时间96h、甲醇添加量0.5%、接种量150mL、摇床转速200r/min。确定最优工艺条件下,耐高温α-淀粉酶酶活为217.2U/mL。

摘要： 本文利用重组毕赤酵母基因工程茵诱导表达可产生耐高温α-淀粉酶,在摇瓶发酵的水平上,从诱导时间、甲醇添加量、pH值、接种量4个因素考察了发酵条件对耐高温α-淀粉酶酶活的影响,结合四元线性回归正交设计研究方法构建出甲醇诱导重组毕赤酵母生产耐高温α-淀粉酶的回归模型;优化最佳工艺参数为：诱导时间96h、甲醇添加量0.5%、接种量150mL、摇床转速200r/min。确定最优工艺条件下,耐高温α-淀粉酶酶活为217.2U/mL。

摘要： 一种耐酸高温淀粉酶菌株及其生产耐酸高温淀粉酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种产耐酸高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BL-mut 08，保藏编号为CCTCC NO：M207193，通过对原有地衣芽孢杆菌系统的复合诱变，保藏、复壮，及选育方法而获得，再经过培养基配方优化及发酵工艺条件优化，建立了生产耐酸高温淀粉酶的方法，于37°C，空气培养72小时左右达到产酶高峰，经过絮凝处理，压滤，超滤浓缩得到浓缩酶液或通过其他后处理加工方式得到不同的淀粉酶制剂，如微丸，颗粒或粉剂。生产的高温淀粉酶具有良好的耐酸活性，可广泛用于食品、医药行业，特别如酒精发酵、味精、抗生素等行业以及纺织、造纸业。

摘要： 本发明公开了一种重组质粒及其制备方法和利用其制备的能表达耐高温α‑淀粉酶的细胞的制备方法及应用。首先制备含有P43启动子和lacO与lacI基因的重组质粒；再将耐高温α‑淀粉酶基因连接至重组质粒当中，质粒中含有枯草芽孢杆菌强启动子P43，大大提高了耐高温α‑淀粉酶的产量，同时质粒中含有的lacO与lacI基因序列，可以使用IPTG进行诱导表达，相比于微生物诱变育种更加的快捷和目的性；然后将受体细胞和和含有耐高温α‑淀粉酶基因的载体通过电击转化之后即可得到得到能表达耐高温α‑淀粉酶的细胞。当使用枯草芽孢杆菌为受体细胞时，其基因信息明确，生产速度快，培养密度大，可提耐高温α‑淀粉酶的产量和酶活力。

摘要： 本发明提供了一株产耐高温α‑淀粉酶的热反硝化地芽孢杆菌Y62及其应用。所述热反硝化地芽孢杆菌Y62的分类命名为热反硝化地芽孢杆菌Geobacillus thermodenitrificans，保藏编号为CGMCC No.17559，其菌落为不规则形状，具有叶状边缘，米白色，表面平坦，直径4‑5 mm；其菌体为直杆状，两端为圆形，周生鞭毛，该菌株具有能够生产耐高温α‑淀粉酶的特性。所述热反硝化地芽孢杆菌Y62能够在最佳产酶发酵培养基和最适接种量的条件下生产出回收率高于90%的耐高温α‑淀粉酶，为热反硝化地芽孢杆菌Y62和耐高温α‑淀粉酶的工程化生产奠定了基础。

摘要： 一种耐酸高温淀粉酶菌株及其生产耐酸高温淀粉酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种产耐酸高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BL－mut 08，保藏编号为CCTCC NO：M207193，通过对原有地衣芽孢杆菌系统的复合诱变，保藏、复壮，及选育方法而获得，再经过培养基配方优化及发酵工艺条件优化，建立了生产耐酸高温淀粉酶的方法，于37°C，空气培养72小时左右达到产酶高峰，经过絮凝处理，压滤，超滤浓缩得到浓缩酶液或通过其他后处理加工方式得到不同的淀粉酶制剂，如微丸，颗粒或粉剂。生产的高温淀粉酶具有良好的耐酸活性，可广泛用于食品、医药行业，特别如酒精发酵、味精、抗生素等行业以及纺织、造纸业。

摘要： 本发明公开了一种利用耐高温α‑淀粉酶制备抗性淀粉的方法，包括步骤：(1)将淀粉、耐高温α‑淀粉酶与水混合得到含耐高温α‑淀粉酶的淀粉悬浮液，并加热使之糊化；(2)高温处理；(3)冷却后进行老化处理；(4)高温‑老化循环处理2‑9次；(5)过滤，滤渣用水洗至中性后，经干燥、粉碎和过筛得到抗性淀粉产品。本发明的利用耐高温α‑淀粉酶制备抗性淀粉的方法，通过对淀粉进行高温和酶解同时处理，有效提高产品中抗性淀粉的含量，是一种操作简便、高效和绿色的方法。

摘要： 本发明提供了一种α‑淀粉酶，其氨基酸序列包括SEQ ID NO.1或与SEQ ID NO.1具有63％以上同一性的序列。本发明提供的α‑淀粉酶是一种耐高温酸性α‑淀粉酶，具有较好的pH稳定性和热稳定性。除可作用于可溶性淀粉外，对于土豆淀粉、红薯淀粉有一定的降解作用。该酶在玉米淀粉深加工、酒精生产、氨基酸和有机酸发酵和饲料行业具有非常广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供一种耐高温α‑淀粉酶制备方法，包括以下步骤：对菌种进行斜面活化，之后对活化后的菌种植入摇瓶种子培养基中进行培养；将摇瓶种子培养基培养获得的菌种植入发酵罐进行多次发酵后获得麸曲；对麸曲进行抽提，获得淀粉酶液和粗制品；将淀粉酶液进行过滤并沉淀，获得淀粉酶制品；本发明用以实现获得耐高温的淀粉酶，进一步使得在储存或者使用时均可以不会因为温度较高导致酶活性失效的情况。

摘要： 本发明公开一种对蚝油原料的耐高温淀粉酶微量残留的快速检测方法，有以下步骤：将具有酶活梯度的原料标样，制成蚝油标样；在通过破坏性试验的蚝油标样中，具有最高的酶活的蚝油标样的酶活即为临界酶活；测定变性淀粉溶液粘度随温度升高而变化的图谱，峰值粘度所对应的温度为峰值温度；测定具有临界酶活的原料标样的变性淀粉溶液在升温过程和维持在峰值温度时其粘度变化的对标图谱；测定待测原料样品的变性淀粉溶液在升温过程和温度维持在峰值温度时其粘度变化的样品图谱；将样品图谱与对标图谱叠加对比，当样品图谱在对标图谱上方时，原料样品酶活符合生产要求，反之，原料样品酶活不符合生产要求。

摘要： 本发明属于α‑淀粉酶的生产工艺技术领域，具体的说是一种固体耐高温α‑淀粉酶的生产工艺，该固体耐高温α‑淀粉酶的生产工艺包括以下步骤：S1:向发酵液中加入发酵液重量的1‑2％的氯化钙，在80‑100°C的条件下进行热处理0.5‑1.5h，得到α‑淀粉酶的溶液；S2:将接料箱置于干燥机的底部；S3:将S1中得到的高温溶液通入干燥机上的溶液箱内，α‑淀粉酶溶液在干燥机内高温气流的作用下进行风干，干燥后的α‑淀粉酶粉末从干燥机底部进入接料箱的内部进行收集；本发明使得高温气体呈喷气管上的喷气孔喷出并在干燥箱体的内部形成高温涡流，使得淀粉酶溶液的干燥效率高，同时便于淀粉酶粉末的收集；同时本发明实现了余热回收，节约热能的同时避免造成温室效应。

摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体涉及在枯草芽孢杆菌中高效表达耐高温α‑淀粉酶的方法、重组启动子以及应用。本发明提供了一系列能高效表达耐高温α‑淀粉酶的组合启动子和信号肽，相对于对照启动子和信号肽组合，所有优化后的启动子与信号肽组合的耐高温α‑淀粉酶相对酶活均有一定的提高，杂合启动子与不同信号肽组合的高温α‑淀粉酶酶活力提高幅度更大，为工业化生产耐高温α‑淀粉酶奠定了基础。