利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用

摘要

本发明涉及利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用。将引发链单链DNA、TdT反应缓冲液和醋酸镁溶液混合，为混合液1；混合液1中加入天然的脱氧核糖核苷酸、dTPT3TP、dTPT3TP衍生物或者dNaMTP中的一种，为混合液2；混合溶液2中加入TdT，为混合液3；混合液3孵育，热处理，使TdT失活，为混合液4；混合液4中加入上样缓冲液，加热处理，使寡核苷酸链完全变性，通过变性胶，分析TdT将非天然碱基添加到寡核苷酸链3’末端的效果。该方法偶联效率高，成本低，操作方便，副产物少，不产生污染性废物。所述寡核苷酸链在DNA末端标记、六碱基信息存储中具有潜在应用价值。