固定化酶构象的荧光光谱分析法

摘要

本发明公开了一种固定化酶构象的荧光光谱分析法。该方法首先在酶分子上接上荧光试剂，然后经底物诱导酶活性构象，用高分子载体将酶构象固定，洗脱底物后得到了含荧光酶的固体颗粒，用荧光分光光度计分析含荧光酶的固体样品在各种环境下的荧光光谱曲线的变化，得出荧光光谱曲线和酶构象变化之间的关系。本发明采用的酶液经过外接荧光试剂处理，再用交联高分子将其构象固定，由于酶蛋白的外围包裹有一定的交联高分子，这就使得本发明所采用的外接荧光的方法对固定化酶这种体系的酶构象变化的分析具有重要的应用价值，从而建立了一种全新的针对固体酶蛋白的构象变化的检测方法，该方法具有操作方法简单、通用性强等特点。