固定化酶乙醇荧光毛细分析法的研究

摘要

提出了固定化酶乙醇荧光毛细分析(IE-EFCA)的新方法和乙醇毛细生物反应器(ECBR)。ECBR用交联剂将乙醇脱氢酶和辅酶I固定于毛细管内壁制成,可重复使用。IE-EFCA法的实验条件:激发波长350 nm、发射波长459 nm、反应时间20 m in、反应温度40℃、磷酸缓冲液浓度0.1 mol/L(pH 7.5)、NAD+浓度5 mmol/L、ADH固定化酶的浓度10 U/L;乙醇的线性范围2.015 g/L,r>0.9958,检出限为1.1 g/L,RSD<1.7%。IE-EFCA法重现性好、操作简便,能节约贵重的酶试剂,实现乙醇的微量化、快速化测定;可制成荧光毛细乙醇测试盒,用于医药、卫生、工业、食品和环境等含乙醇样品的测定。