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用于CRISPRi系统的质粒、其构建方法及其在使鼠疫菌目的基因定向沉默中的应用

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本发明公开了一种用于CRISPRi系统的质粒、其构建方法及其在使鼠疫菌目的基因定向沉默中的应用，属于基因编辑技术领域，其中质粒包含sgRNA表达质粒和pdCas9‑tetO质粒，将本发明构建的双质粒CRISPRi系统转化入鼠疫耶尔森氏菌中在诱导剂脱水四环素盐酸盐存在下可使目的基因定向沉默。本发明的CRISPRi系统可以大幅度降低目的基因的转录水平与蛋白水平，并使鼠疫菌表现出缺失目的基因的相关表型，能作为在鼠疫菌中进行高通量基因功能研究的新型工具。

著录项

公开/公告号CN109852627B

专利类型发明专利
公开/公告日2022-07-05

原文格式PDF
申请/专利权人中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;
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申请/专利号CN201811601943.4
发明设计人王桐;杜宗敏;杨瑞馥;宋亚军;
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申请日2018-12-26
分类号C12N15/70;C12N15/66;C12N9/22;
代理机构北京尚诚知识产权代理有限公司;
代理人鲁兵
地址 100071 北京市丰台区东大街20号院
入库时间 2022-09-06 00:34:49

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1. 用于CRISPRi系统的质粒、其构建方法及其在使鼠疫菌目的基因定向沉默中的应用 [P] . 中国专利： CN109852627B . 2022.07.05
2. 用于CRISPRi系统的质粒、其构建方法及其在使鼠疫菌目的基因定向沉默中的应用 [P] . 中国专利： CN109852627A . 2019-06-07
3. gene expression construct, gene expression system, variance of a gene expression system, process for increasing expression or enhancing the translational activity of a sequence derived from a rna-2 genome segment of a bipartite virus, methods to express a protein of interest in a host organism, to improve translation of a heterologous protein of interest from a gene or open reading frame, to express a protein gene expression construct, gene expression system, variation of a system Gene Expression, A Process for Increasing Expression or Improving the Translational Activity of a Sequence Derived from a Rna-2 Genome Segment of a Bipartite Virus, Methods for Expressing a Protein of Interest in a Host Organism, to Improve Translation of a protein of heterologous interest of an open reading frame or gene to express a protein in a plant and plant to generate a protein of interest, and host organism [P] . BRPI0906509A2 . 2015-12-01

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