一种基于诱导性启动子鉴定微生物基因功能的方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域，公开了一种基于诱导性启动子鉴定微生物基因功能的方法，选取基因上游的基因间序列，利用启动子预测软件预测可能的启动子，比对得到待用的启动子序列；针对目的基因的启动子特异性设计4条特异性引物，用于扩增得到上下游同源臂的特异性引物；上下游同源臂的获取；功能基因盒的组装；设计引物得到大肠杆菌复制起点；同源重组质粒的构建；质粒提取；电转化；阳性克隆验证；进行基因功能性检测。本发明方便快捷，能在较短的时间批量化完成，包括本发明以运动发酵单胞菌为例的微生物菌株改造，并横向及纵向完成基因鉴定分析；该实验方法也可推广到其它可以通过同源重组实现基因片段重组的菌体改造工作。