泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的表达纯化方法

摘要

本发明公开了泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的表达纯化方法。本发明提供了一种生产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的方法，包括将泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶编码基因导入受体酵母；将重组酵母于BSM培养基培养，待甘油消耗完全进行甘油补料发酵阶段、甲醇补料诱导表达阶段和混合补料诱导表达阶段。本发明工程菌经高密度发酵，发酵液酶活可达159500U/mL(蛋白含量31.7mg/mL)。所产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶最适pH5.0，在pH 2.0‑9.0保持稳定；最适温度55℃，在60℃以下保持高酶活力；底物特异性专一。本发明在食品、饲料等行业具有应用价值。