ALB_SIN/IL－18_MAT杂交细胞因子

摘要

ALB_SIN是人血清白蛋白的信号肽，IL-18_MAT为人IL-18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB_SIN与IL-18_MAT的嵌合分子。从人基因组DNA扩增ALB_SIN序列；由人IL-18原核表达质粒获得IL-18_MAT序列。以非对称PCR技术得到ALB_SIN编码区的反义链和IL-18_MAT正链。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)产生具有ALB_SIN与IL-18_MAT的杂交编码序列。定向插入pcDNA3，构建杂交IL-18的真核表达质粒。测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成，且无移码。该表达质粒转染293、Vero和7721细胞，表达具有生物活性的人IL-18。