切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法

摘要

本发明公开了切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法。本发明提供的切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法采用CRISPR/Cas9系统进行，CRISPR/Cas9系统中包含名称分别为sgRNA1和sgRNA2的两个sgRNA，sgRNA1识别的靶序列为pXO1质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列；sgRNA2识别的靶序列为pXO2质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列。本发明成功得到了不含有pXO1和pXO2质粒的炭疽芽胞杆菌，构建方法简单，切除效率高，且一次能筛选到三种不同质粒丢失表型的菌株，为构建新的疫苗株提供了更快捷、更方便新的手段，为炭疽芽胞杆菌的防治提供了新的思路。