一种用于低丰度DNA突变的富集技术及其应用

摘要

本发明属于分子生物学领域，公开了一种用于低丰度DNA突变的富集引物、富集方法及试剂盒，用于低丰度DNA突变的检测方法及检测试剂盒。本发明基于PCR原理富集低丰度DNA突变，富集引物的正向引物包括2条短引物，长度为10‑16nt，2条短引物中AF引物可与野生型和突变型模板均匹配。AR引物设计有与突变位点互补的碱基，位于AR引物的中间位置或中间偏5’端位置，且AR引物3’端修饰有MGB基团。AF引物3’端与AR引物5’端与模板结合的位置间隔0‑5个碱基。本发明所述富集方法可将丰度在万分之一的突变型模板富集100～1000倍，富集产物可用多种方法进行后续分析，操作简单，应用灵活，灵敏度高。