产脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法

摘要

本发明涉及构建产脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌株及其构建方法。脂肪酶在酶催化反应中,反应如在油水界面促进酯水解,而在有机相中可以酶促合成和酯交换。因此可以以地沟油或工业废油和低碳醇为原料用来合成生物柴油。通过将重组脂肪酶Lip14基因转入毕赤酵母X33中从而大量发酵脂肪酶。通过以对硝基苯基棕榈酸酯为底物测定脂肪酶对长链脂类的水解能力,对硝基苯基月桂酸酯和对硝基苯基辛酸酯测定脂肪酶对中链脂类的水解能力,对硝基苯基丁酸酯测定脂肪酶对短链脂肪酶的水解能力。确定其对中长短链脂类的水解活性。为将其在催化生产生物柴油的实验中奠定了基础。