用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用

摘要

本发明提供了一种用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用。该技术方案利用单链抗体T18与肿瘤内皮细胞标志分子TEM1特异性结合的特性，构建了AIF‑T18蛋白复合物，从而实现凋亡诱导因子AIF对肿瘤细胞的靶向给药，提升其对肿瘤细胞的诱导凋亡作用。本发明首先以pET302质粒为载体构建了整合有AIF‑T18表达基因的重组质粒，而后以原核表达系统E.coli BL21为宿主将重组质粒导入其中，得到了具有稳定表达能力的重组菌株。在此基础上，本发明围绕该重组菌的特性设计了高效的蛋白表达方法，并针对以包涵体形式存在的蛋白表达产物匹配了适宜的变性、复性、纯化条件，从而实现了AIF‑T18的有效制备。