一种可解除免疫抑制并增强肿瘤靶向性杀伤的间充质干细胞的制备方法

摘要

本公开提供了一种可解除免疫抑制并增强肿瘤靶向性杀伤的间充质干细胞的制备方法，该方法包括如下步骤：S1、将针对PD‑1基因的敲入位点的sgRNA和Cas9蛋白混合以形成RNP复合物；S2、形成携带TRAIL基因的待转染AAV病毒颗粒；S3、将干细胞的悬液与所述RNP复合物的悬液混合并进行电转，得到电转后的培养物；S4、向所述电转后的物料中加入待转染的AAV病毒颗粒的悬液以进行转染，得到转染后的培养物；S5、将所述转染后的培养物极限稀释后进行单克隆化培养，通过PCR及测序并筛选出进行了基因定向敲入的单克隆细胞株。通过上述技术方案，本发明制备了一种可解除免疫抑制并增强肿瘤靶向性杀伤的人间充质干细胞。