一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用

摘要

本发明为一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用，以光敏色素荧光蛋白iRFP为模板，在氨基酸97‑98位将其拆分为不发荧光的氮端和碳端片段iRN97和iRC98，当这两个片段分别与相互作用的蛋白对相融合表达时，不发荧光的两个片段就可以被拉近而产生iRFP的荧光；iRN97和iRC98分别与艾滋病毒整合酶IN及细胞蛋白P75相融合表达，通过iRN97和iRC98的荧光互补，在活细胞内对IN与p75的相互作用进行研究，当药物能够抑制该蛋白‑蛋白之间的相互作用时，iRN97和iRC98则不能被拉近，从而抑制荧光的恢复。该新系统为一种简单、有效、方便的抑制蛋白相互作用的药物的评价系统。