一种酶活和稳定性提高的甲酸脱氢酶突变体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种酶活和稳定性提高的甲酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上，将第10位丙氨酸突变成半胱氨酸。本发明得到的突变体酶比酶活较突变前提高1.3倍，60度的半衰期(t_1/2)较突变期提高了6.8倍，铜离子耐受性较突变前提高30倍，pH＝4的条件下稳定性提高了2.0倍同时催化效率提高1.4倍。本发明表明10位氨基酸残基突变成半胱氨酸与天然甲酸脱氢酶的30位半胱氨酸残基形成正确的二硫键从而提高了酶的稳定性和催化效率，加强了该酶的工业应用潜力。