一种筛选N-酰基高丝氨酸内酯类模拟物的方法

摘要

本发明属于病原微生物预防与控制领域，具体涉及一种筛选N‑酰基高丝氨酸内酯类模拟物的方法，以QS分子C4‑AHL感应诱导抗性载体pSB538，带有嗜水气单胞菌群体感应系统ahyRI’和氯霉素抗性基因Cmr，AhyR蛋白感应C4‑AHL分子或者其模拟多肽时，激活AhyI’启动子，诱导抗性基因表达；在培养基中培养，只有添加C4‑AHL分子或者产生其模拟多肽才能使细胞存活；利用M13噬菌体不裂解宿主菌并可分泌到胞外的特性，侵染携带pSB538的大肠杆菌，在添加氯霉素抗性的平皿中筛选出孵育后在可见光下显蓝色的噬菌斑；然后将该噬菌体扩增，加入带有pSB536的QS感应菌株中，通过C4‑AHL模拟多肽可诱导生物发光的方法验证，最后测序获得特异模拟多肽序列。