一种重组解脂耶氏酵母工程菌株及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种重组解脂耶氏酵母工程菌株及其构建方法和应用。本发明，以琥珀酸脱氢酶的Sdh5亚基为目标，借助基因组的同源壁替换完成基因的敲除，使TCA循环中的琥珀酸脱氢酶复合体失去活性，琥珀酸无法下一步代谢而得到积累，利用甘油作底物好氧发酵生产琥珀酸，通过在敲除解脂耶氏酵母sdh5基因的基础上进一步敲除乙酰辅酶A水解酶(acetyl‑CoA hydrolase)编码基因ach1，不仅使得新构建的重组解脂酵母乙酸产量大幅下降，而且重组解脂耶氏酵母的发酵性能获得极大提升，包括生长速率和发酵生物量的提高，同时琥珀酸的产量和产率得到提高。