原代肝细胞的分离制备方法

摘要

本发明公开了一种原代肝细胞的分离制备方法，它包括如下步骤：a、肝脏的体外灌流：取离体的动物肝脏，先用灌流液Ⅰ灌流，灌流速度为300‑1000mL/min，灌流时间为10‑12分钟；再用灌流液Ⅱ灌流，灌流速度为300‑1000mL/min，灌流时间为2‑3分钟；最后用灌流液Ⅲ灌流，灌流速度为400‑1200mL/min，灌流时间为25‑40分钟；b、分离肝细胞：洗涤步骤a处理后的肝脏，收集肝细胞悬液，过滤、离心，收集沉淀即可。本发明原代肝细胞的分离制备方法，可以分离得到的肝细胞数量、活率与纯度均较高的肝细胞，应用前景良好。