基于液质联用检测膜蛋白与配体亲和力的混合物筛选方法

摘要

本发明公开了一种基于液质联用的膜蛋白与配体亲和力测定方法。该方法为：a）把纯化的膜蛋白组装到生物膜模拟系统Nanodisc中并去除去垢剂；b）将组装有膜蛋白的Nanodisc和化合物进行孵育处理；c）用重复超过滤方法将与膜蛋白有非共价结合的化合物富集于过滤膜上部；d）用液质联用仪器检测过滤膜上部化合物浓度来鉴定与膜蛋白有非共价结合的化合物。本发明提供了一种通过将膜蛋白组装到生物膜模拟系统进行样品处理，并利用液质联用技术测定小分子化合物和膜蛋白结合亲和力的方法。该方法具有不依赖任何的标记，不需要经过固定化等步骤，通量高，样品需求量小，可对混合物进行筛选，操作简单，灵敏度高等特点，适用于不同种类的膜蛋白检测，有很好的通用性。