一种ɑ-角蛋白底物特异性提高的角蛋白酶及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种ɑ‑角蛋白(羊毛鳞片)的底物特异性提高的角蛋白酶及其应用，属于遗传工程领域。本发明采用定点突变技术将地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis BBE11‑1的角蛋白酶(ker)基因进行定点突变并克隆连接到枯草芽孢杆菌表达载体pMA5，转化Bacillus subtilis WB600，经纯化验证得到一株可以产具有较好ɑ‑角蛋白底物特异性的角蛋白酶的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600‑pMA5‑kerMA，该菌株表达的角蛋白酶在对天青角蛋白(ɑ‑角蛋白)的比酶活较野生型增加了50％。同时突变体较野生型角蛋白酶具有更好的羊毛织物防毡缩效果，这为角蛋白酶的应用奠定了良好的基础。