一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡

摘要

本实用新型涉及一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡，包括壳体，所述壳体一侧开设有放置槽，所述放置槽内存放有发光棒，所述壳体还开设有用于插放发光棒的插槽，所述插槽直径与所述发光棒相当；所述插槽与所述放置槽位于不同平面；当所述发光棒插入所述插槽时形成照明区间，所述照明区间设置有点样孔和显示视窗，通过在壳体上开设插槽，使得发光棒从放置槽取出后，将一端插入插槽，使得发光棒的大部分均暴露在壳体外，发光时可以提供光源，发光棒照射在壳体上的区域为照明区间，在照明区间设置点样孔和显示视窗，方便了实验人员后续的点样、读卡和查看。

说明书

技术领域

本实用新型涉及医疗器械技术领域，具体地说，是一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡。

背景技术

肿瘤标志物的定量检测对于肺癌的早期筛查、病理分型以及预后判断均具有重要意义。分析筛选出灵敏度高、特异性好的肿瘤标志物，开发发展快速有效的高灵敏度定量方法能够促进肺癌的及早发现，及时治疗，从而有效降低死亡率。肿瘤标志物和分子标志物是开展肺癌的早筛早诊以及晚期患者的个体化治疗的关键因子之一。肿瘤标志物在肿瘤普查、诊断、判断预后和转归、评价治疗疗效和高危人群随访观察等方面都具有较大的实用价值。蛋白类肿瘤标志物是目前临床上比较常用的用于肿瘤检测的生物分子，但是，针对肺癌来说，尚没有敏感性高、特异性好的蛋白标志物，很难利用单一的肿瘤标志物对肺癌进行早期检测，需要对多种蛋白类标志物(如CEA、CYFRA21-1等)进行联合检测。癌胚抗原(CEA，又称为CEACAM-5或CD66e)，分子量约220KDa左右，位于人类19号染色体，是人类胚胎抗原特异性决定簇的酸性糖蛋白，由加拿大科学家Samuel 0.Freedman和Phil Gold于1965年从结肠癌胎儿患者的肠及血清中首次被检测出来，现在已经在成年人的几种正常组织中被鉴定出。CEA的过量表达在许多类型的癌症中被观察到，包括乳腺癌、甲状腺癌、肝癌、肺癌、胃癌、胰腺癌以及结直肠癌。随着研究的深入，临床发现CEA在肺癌组织、正常肺组织中均有表达，但肺癌组织中的表达明显高于正常组织，因此CEA被认为是肿瘤相关抗原。细胞角质蛋白19片段(CYFRA 21-1)，分子量约为30KDa，是细胞角蛋白家族中最小的一员，分子量仅为36000Da，在简单上皮细胞及对应的恶性细胞中均有表达。细胞角蛋白19(CYK-19)是一分子量约40000Da的Ⅰ类角蛋白(酸性蛋白)，是角蛋白家族中最小的成员。CYK-19广泛分布在正常组织表面，如层状或鳞状上皮中。在恶性上皮细胞中，激活的蛋白酶加速了细胞的降解，使得大量细胞角蛋白片段释放入血，其可溶性片段可与两株单克隆抗体KS19.1和BM19.21特异性结合，故称为CYFRA21-1。在恶性肺癌组织中，CYFRA21-1含量丰富，尤其是在肺鳞癌中有高表达。

胶体金免疫层析是用胶体金标记技术和免疫层析技术结合的以硝酸纤维素膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术，该技术是将特异的抗体固定在试纸条上，检测标本加在试纸条的一端，通过毛细血管作用使样品溶液在层析材料上泳动，样本中的抗原与层析材料中的抗体发生特异性结合反应，形成的复合物被富集或固定在层析条上的特定区域(检测线)，通过标记免疫技术显色，特点是可进行单份标本检测且简便、快速、不需任何仪器设备，因此，发展非常迅速。

但是试纸条的读取，需要非常良好的光源才能够读取，并且由于各种相关因素，倒置试剂卡卡上的显色不够明显或光线不佳不方便被使用人查看和读取，因此需要对其进行改进。

实用新型内容

本实用新型的目的是针对现有技术的不足，提供一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡。

为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案是一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡，包括壳体，所述壳体一侧开设有放置槽，所述放置槽内存放有发光棒，所述壳体还开设有用于插放发光棒的插槽，所述插槽直径与所述发光棒相当；所述插槽与所述放置槽位于不同平面；当所述发光棒插入所述插槽时形成照明区间，所述照明区间设置有点样孔和显示视窗。

优选的，所述发光棒包括透光塑料外管和脆性内管，所述外管内存放有荧光染料和苯基草酸酯，脆性内管内存放有过氧化物。

本实用新型优点在于：

通过在壳体上开设插槽，使得发光棒从放置槽取出后，将一端插入插槽，使得发光棒的大部分均暴露在壳体外，发光时可以提供光源，发光棒照射在壳体上的区域为照明区间，在照明区间设置点样孔和显示视窗，方便了实验人员后续的点样、读卡和查看。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例的技术方案，下面将对实施例中涉及的技术方案对应附图加以简单说明，显而易见的，本说明书中所描述的附图仅仅是本实用新型的一些可能的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出任何创造性劳动的基础上，可以依据以下附图获得与本实用新型技术方案相同或相似的其他附图。

附图1是本实用新型一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡的立体示意图；

附图2是本实用新型一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡的使用示意图；

附图3是本实用新型一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡发光棒结构示意图。

附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示：

1、壳体；2、点样孔；3、显示视窗；4、放置槽；5、发光棒；51、透光塑料外管；52、脆性内管；6、插槽。

具体实施方式

本实用新型的一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡，通过将发光棒插入插孔，对壳体形成照明区间，从而方便实验人员查看试剂卡的结果。

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型所描述的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，本说明书中所描述的实施例仅是本实用新型的一部分可行技术方案，本领域普通技术人员基于本实用新型的实施例，在没有作出任何创造性劳动的基础上得到的其他实施例，应当视为属于本实用新型保护的范围。

需要说明的是，本实用新型实施例中所使用的“第一”“第二”等描述近用于描述目的，不应当理解为其指示或隐含指示所限定的技术特征的数量，由此，本说明书各个实施例中限定有“第一”“第二”的特征可以表明包括至少一个该被限定的技术特征。

本说明书中所记载的本实用新型的各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时，应当认为该技术方案的结合不存在。

如图1到图3所示，一种基于胶体金免疫层析法的两种肺癌标志物快速检测卡，包括壳体1，壳体1一侧开设有放置槽4，放置槽4内存放有发光棒5，壳体1还开设有用于插放发光棒5的插槽6，插槽6直径与发光棒5相当；插槽6与放置槽4位于不同平面；当发光棒5插入插槽6时形成照明区间，照明区间设置有点样孔2和显示视窗3。

具体的，通过在壳体1上开设放置槽4，用以存放发光棒5，发光棒5用于在光线条件不好时，为检测卡提供可读光源，使得试剂卡可以在光线不佳时继续使用，提高了本发明的实用性，也可以通过选择不同颜色的发光棒5，用以在不同情况下凸显试剂卡的检测结果，通过在壳体1上开设插槽6，使得发光棒5从放置槽4取出后，将一端插入插槽6，使得发光棒5的大部分均暴露在壳体1外，发光时可以提供光源，发光棒5照射在壳体1上的区域为照明区间，在照明区间设置点样孔2和显示视窗3，方便了实验人员后续的点样、读卡和查看。

进一步的，壳体1内设有反应腔，反应腔内设置有反应垫，反应垫从左至右依次设置有样品垫、金标垫、层析垫和吸水垫，在层析垫的左侧搭接金标垫，在金标垫上搭接样品垫，在层析膜右侧搭接吸水垫。在层析膜上设置有串联排列的检测线一、检测线二和质控线。

具体的，通过样品垫搭接在金标垫上，金标垫搭接在层析垫上，层析垫搭接在吸水垫上，使得样品滴可以从样品垫不断渗透至吸水垫，从而再经过层析垫的时候完成检测显色。

进一步的，所述层析垫材质为硝酸纤维膜，样品垫和金标垫材质为玻璃纤维膜或聚酯材料。所述吸水垫材质为吸水纸，在所述层析垫上设有串联排列的检测线一、检测线二和质控线，所述检测线一、检测线二和质控线的间隔为3.5～5mm。在所述金标垫上包被有被胶体金标记的抗CEA第二抗体、抗CYFRA21-1第二抗体和兔IgG抗体，在所述检测线一上包被有抗CEA第一抗体，所述检测线二上包被有抗CYFRA21-1第一抗体，在所述质控线上包被有鼠抗兔IgG抗体，所述抗CEA抗体和抗CYFRA21-1抗体为纳米抗体。

具体的，将样品滴加入加样口，当样品中含有CEA和CYFRA21-1时，CEA和CYFRA21-1扩散至金标垫率先与标记有胶体金的抗CEA和抗CYFRA21-1第二抗体发生特异性结合，形成的复合物在层析作用下继续向吸水纸方向移动，到达检测线一时抗CEA第二抗体/CEA复合物与抗CEA第一抗体结合形成双抗夹心复合物，并聚集在检测线一上显示红色，即为CEA阳性；这时抗CYFRA21-1第二抗体/CYFRA21-1复合物继续层析到检测线二上与抗CYFRA21-1第一抗体特异性结合，形成双抗夹心免疫复合物并聚集在检测线二上显红色，即为CYFRA21-1阳性；而被胶体金标记的兔IgG抗体在层析作用下，会一直移动到质控线上与羊抗兔IgG抗体结合形成复合物聚集在质控线上，显红色，说明该检测卡正常。

需要说明的是，本实用新型的结果均为红色，因为发光棒5的颜色需避免红色，应当选择凸显红色的光线。

本检测卡检测过程用时5～10min，可根据检测线是否出现红色判断样品阴阳性，根据质控线是否显红色判断检测卡是否正常，结果是否真实可信。

进一步的，点样孔2和显色视窗均与反应腔联通，显色视窗正对检测线一、检测线二和质控线，点样孔2正对样品垫。

具体的，通过色视窗正对检测线一、检测线二和质控线，点样孔2正对样品垫以方便点样和显示结果。

进一步的，发光棒5包括透光塑料外管51和脆性内管52，外管内存放有荧光染料和苯基草酸酯，脆性内管52内存放有过氧化物。

具体的，当发光棒5弯曲时，脆性内管52破裂，脆性内管52存放的过氧化物如过氧化氢与存放在透光塑料外管51的过氧化氢将苯基草酸酯氧化，形成一种叫做苯酚的化合物和不稳定的过氧酸酯，过氧酸酯分解，形成更多的苯酚和环状过氧化合物，环状过氧化合物分解，形成二氧化碳，分解物将能量释放给染料，染料原子中的电子跃迁至较高的能级，然后落回原位，以光的形式释放出能量，所释放的能量被传递给荧光染料。

进一步的，壳体1为长方体，插槽6设置在远离底面的一侧。

具体的，通过长方体的壳体1，可以确保试剂卡平稳的摆放在桌面等位置，插槽6设置在远离底面的一侧，可以使得发光棒5在插入插槽6后与桌面垂直，稳定的提供照明区间，方便对试剂卡检测结果进行查看。

以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本实用新型的保护范围。