一种改进的腺病毒载体系统及其病毒颗粒的制备和应用

摘要

本发明公开了一种改进的腺病毒载体系统和病毒制备方法，它是以pDONR221载体为初始载体进行改进，插入了多克隆位点和IRES-GFP片段。该系统结合了酶切连接和重组反应技术，既能高效构建载体，又降低了试剂成本。本发明还公开了后续病毒载体酶切后，纯化的改进方法，该方法摒弃了传统的酚：氯仿：异戊醇纯化法，而使用常规的DNA回收柱或直接加热灭活法，简单易行，缩短了操作时间，降低了材料成本，并且无需使用有毒的酚、氯仿试剂，利用这两个方面结合起来的腺病毒系统，制备效率提高，成本降低，在侵染细胞中仍然保持高效。