老年大鼠脑血管内皮细胞原代培养方法

摘要

本发明涉及老年大鼠脑血管内皮细胞原代培养方法，步骤如下：（1）取出老年大鼠脑组织的灰质部分，制得样品组织；（2）置于胎牛血清的分离液的培养皿中经吹打分散和生物酶消化后，制得分散细胞；（3）离心，制得毛细血管；（4）将毛细血管重悬于分离液中，经消化后，制得毛细血管悬液；（5）离心后，沉淀重悬于分离液中，经Percoll浓度梯度离心，制得脑血管内皮细胞；（6）置于培养液中，经培养后，经消化传代或冻存即可。本发明采用低浓度胰酶或含1mM EDTA的PBS消化细胞，使细胞可传代3次而仍保持脑血管内皮细胞的特性；并且经冻存复苏后仍可保持脑血管内皮细胞的纯度和特性；因此，可节省大量的时间和金钱。