用于快速筛选和鉴定有效shRNA的载体及其筛选和鉴定方法

摘要

本发明提供了一种快速筛选和鉴定有效shRNA真核表达载体，将如下结构构建至同一个真核表达载体上：1)由polIII型启动子调控的shRNA表达框结构，即polIII型启动子+shRNA插入位点；2)由CMV启动子调控的荧光蛋白表达框，并在荧光蛋白基因后面紧跟一个多克隆位点(MCS)；3)由SV40启动子调控的荧光蛋白表达框，该荧光蛋白的荧光颜色与第2)中的荧光蛋白的荧光颜色不同。本发明还提供了用上述载体筛选或验证有效shRNA的方案，利用此载体和方法筛选和鉴定有效shRNA，不需做RT-PCR或Western-blot检测，快速、简单、方便、成本低廉，特别适合于从多个预先设计的备选shRNA中筛选有效shRNA。