一种酿酒酵母gshl缺失突变株的构建方法及应用

摘要

本发明公开了一种酿酒酵母gsh1缺失突变株的构建方法及应用，步骤是：A、获得Δgsh1突变株：酿酒酵母基因同源重组敲除原理、引物设计、敲除片段转化方法按照文献所描述的方法进行(Yeast，1998，14：953-962)，该方法是目前酿酒酵母中基因敲除的通用方法；依据酿酒酵母gsh1基因序列设计引物：上游引物P1和下游引物P2；利用上游引物P1和下游引物P2对质粒pFA6a-Kan MX6进行PCR扩增，获得含酿酒酵母gsh1基因上下游序列的敲除片段；通过醋酸锂/PEG的转化方法将敲除片段导入酿酒酵母BY47421菌株细胞，筛选得到酿酒酵母的Δgsh1突变株YJL101C。利用微生物遗传学方法构建酿酒酵母细胞Δgsh1突变株，再利用突变株进行氯化镉等重金属细胞毒性的检测，以提高细胞毒性检测灵敏度，方法易行，操作简便。